오늘의 주제 커피믹스에는 카페인이 얼마나 들어 있을까? (농도 ppm 분석)

Coffee 커피 한 잔

오늘의 실험 준비물

※ [메인 실험 장비] / Shimadzu HPLC(High Performance Liquid Chromatography)

[커피믹스 샘플 5가지]

– [Max**] 모*골드 마일드 12.0g

– [*터*] 아*비카 블랙 1.6g

– [E*I*A] 마*드 아메리카노 1.0g

– [Max**] 맥*카누 다크로스트 아메리카노 0.9g

– [회사 원두] 5.0g

※ 구매처 회사에서 가져옴 ㅋㅋㅋㅋ

※ 오늘의 실험 준비물


오늘의 실험 방법

저번 실험에서는 검량선 없이 Standard & Sample 단순 비교 실험을 했었는데

오늘 실험 방법은 표준 검량선을 그려서 미지 시료 χ 값을 구하는 방식으로 진행 예정

정확한 실험 결괏값을 얻으려면 실험 횟수를 3회 이상 반복 실험을 해야 하지만

나는 뭐 그냥 재미로 해보는 실험이기에! 1회만 진행

– 분석 법 검증 없음

실험. 1

카페인 표준품 10ppm, 50ppm으로 표준 검량선을 만든다.

※ 카페인 표준품 시료는 아는 지인분한테 실험하려고 2018년 9월에 샘플 받아 놨는데

8개월 동안 냉장고에 잠들어 있다가 이제야 밖으로 나옴

표준품도 믿을 수가 없는 그런 상황 ㅋㅋㅋㅋㅋㅋㅋ 그냥 실험해보겠음

실험. 2

Coffee Sample 만들기 (즉, Lovenism D.I.Y 믹스커피.)

커피믹스 1개 + 뜨거운 정수기 물 100mL 1~2분 정도 숟가락으로 대충 쉐킷쉐킷

기기분석을 하기에는 카페인 Peak Value가 너무 높게 나오기 때문에 1/25 희석(Dilution)


[이동상 Mobile Phase]

Acetonitrile : Water 비율 (6:4)

[HPLC Operating Condition]

– Detector Wavelength : 280nm

– Flow Rate : 1.0mL/min

– Injection Volume : 20μL

– Column : [C18 ODS] 비극성 컬럼

– Column Temp : 35 ℃

– Gradient program A(%) ** B(%) **

– ‘Rinse’ / ‘Purge’ / ‘Degassing’ 후, 진행

커피 1스틱 + 뜨신물 100mL + 1/25 희석

4000RPM / 10min 원심분리하여 상등액을 사용 / Vial 1.5mL 실린지 필터는 Pour Size 0.45 μm

오늘의 소소한 공부

※ 카페인 구조식

오늘 실험의 메인 원료 : Caffeine

화학식/분자량 C8H10N4O2 194.19g/mol


실험 결과 정리 (데이터 읽기)

실험이 끝나고 각 제조사/판매원 본사에 전화를 ☎ 했다.

실제로 커피믹스 1개당 얼마의 카페인 함량을 문의

– [Max**] 모*골드 마일드 12.0g →→→→→카페인 함량 49.6mg

– [Max**] 맥* 카누 다크로*트 아메리카노 0.9g →→→→→카페인 함량 37.0mg

– [*터*] 아*비카 블랙 1.6g →→→→→카페인 함량 39.8mg

– [E*I*A] 마*드 아메리카노 1.0g →→→→→ 카페인 함량 37.0mg

커피를 탈 때 사람마다 물의 양이 다른데 보통 커피믹스 1개당 물의 양은 80mL ~ 120mL

하지만 우리는 물양과 상관 없이 한 잔을 다 비우기 때문에 결과적으로는 커피 1잔 당 30mg ~40 mg 카페인을 섭취한다.

※ 식약처피셜 카페인 일일 섭취 권고량: 성인 400mg 이하, 임산부 300mg 이하, 어린이‧청소년 2.5mg/kg(체중) 이하

실험 결과

카페인 표준품

10ppm 카페인 Area 값 = 522772

50ppm 카페인 Area 값 = 2605953

522772 x 5 = 2613860 ÷ 2605953 x 100 = 100.3% 지인한테 받은 표준품 결과 100% 정확한 표준품 이었다. 딱 5배 나옴

카페인 표준품 Ret Time = 1.714 sec

카페인 샘플 결과

카페인 샘플 Ret Time = 1.711 ~1.719 sec

즉, 실험에 참가했던 모든 커피에서 카페인이 검출 되었다. (정성분석 성공)

1ppm = 1mg/L

즉 , 커피스틱 + 물 100mL 섞어서 먹었을 때

약 1mL 당 0.3mg ~ 0.7mg 정도의 카페인을 섭취한다는 이야기? 이렇게 계산하는 게 맞나?ㅋㅋ

– 커피 1스틱 + 물 100mL 농도 ppm 결과 값

[Max** 믹스] 25.75ppm x 25 = 643ppm = 643mg/L

[*터*] 26.62ppm x 25 = 615ppm = 615mg/L

[E*I*A] 19.12ppm x 25= 478ppm = 478mg/L

[Max** 블랙] 15.67ppm x 25 = 391ppm = 391mg/L

[회사 원두 5g]15.61ppm x 25 = 390ppm 390mg/L

참고로….나는 커피 마시면 속이 울렁거림 카페인이 몸에 맞지 않는다. ㅠㅠ

내가 커피 부작용 이라니~~

그래서 회사에서 커피 안 마시고 주로 차를 마심 그런데…차에도 ….카페인이 들어 있는 걸

무튼

오늘 실험 종료~ 다음에는 또 뭘 해볼까….

#카페인 #부작용 #Caffeine

※ 모든 커피에서 카페인 검출

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※ 표준품 검량선 & 샘플 검량선 그리기

※ 실험 결과값

#커피 #Coffee #카페인 #HPLC #액체크로마토그래피